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大(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)顯(xian)色(se)(se)(se)培養基(ji)是青島海博生物(wu)公司改良的培養基(ji),用于食品(pin)、水(shui)、牛奶、冰激凌和肉制品(pin)中大(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)的快速檢(jian)測。大(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)顯(xian)藍綠色(se)(se)(se),大(da)腸(chang)(chang)(chang)菌(jun)(jun)群顯(xian)無(wu)色(se)(se)(se),其它(ta)菌(jun)(jun)顯(xian)黃色(se)(se)(se)或無(wu)色(se)(se)(se),革蘭氏陽性菌(jun)(jun)被抑制。
成份(g/L)
特殊營養物質 | 37.9 |
顯色劑 | 0.2 |
瓊脂 | 12.0 |
pH 6.8±0.2 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成(cheng)份以獲得Z佳的(de)結果。
用法
稱取本品 50.1g 加(jia)入 1000ml 蒸餾水,加(jia)熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶,121℃ 高壓滅(mie)菌(jun) 15 分鐘。取 1ml 制備好的(de)樣(yang)品液加(jia)入直徑為 9cm 無(wu)菌(jun)平皿(min)中心,傾(qing)入冷卻至(zhi)(zhi) 45-50℃ 培(pei)(pei)(pei)養基約(yue) 15ml,混勻,凝固(gu)后,36℃ 倒(dao)置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養 18~24h 。或冷卻至(zhi)(zhi) 45-50℃ 時(shi),傾(qing)入無(wu)菌(jun)平皿(min),瓊(qiong)脂*凝固(gu)后,在 37℃ 的(de)培(pei)(pei)(pei)養箱中倒(dao)置(zhi)放置(zhi) 1-2 小時(shi),加(jia)入適當稀釋度的(de)樣(yang)品液 1ml,涂布于培(pei)(pei)(pei)養基上,36℃ 培(pei)(pei)(pei)養18~24h。
操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
3、36℃ 培養18~24h,選用有 30~200 個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。
總大腸桿菌=藍綠色菌落;
4、對可(ke)疑大(da)腸桿菌菌落(luo)可(ke)劃線接種到營養(yang)瓊脂平板上,36℃ 培養(yang) 12-16 小時,挑取單菌落(luo)做大(da)腸桿菌全套(tao)生化試驗(本公司(si)有(you)生化鑒定(ding)管套(tao)裝 4種x4套(tao))。
質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養(yang) 18~24h 小時(shi):
質控菌株 | ATCC | 生長(chang)情況 | 菌落顏色 |
單增李氏菌 | 19114 | -/+ | 無色 |
金黃色葡(pu)萄(tao)球菌 | 25923 | -/+ | 無色 |
大(da)腸桿菌(jun) | 25922 | +++ | 藍色 |
沙門氏菌(jun) | 14028 | +++ | 無色 |
產(chan)氣腸桿菌 | 23355 | +++ | 無色 |
方法的局限性
本培養基鑒定大腸桿菌,少數情況下可能會出現假陽性,但不會出現假陰性,有時可能需做其它補充試驗。
典型特征
大腸桿菌典型菌落為(wei)藍(lan)綠色(se),大腸菌群為(wei)無(wu)色(se)菌落,其它細(xi)菌為(wei)無(wu)色(se)或黃色(se)菌落。
大腸桿菌顯色培(pei)養基 大腸桿菌ATCC25922 | 大腸桿菌顯色培養基 產(chan)氣(qi)腸桿菌ATCC35029 |
大腸桿菌顯色培養基 沙(sha)門氏菌ATCC14028 | 大腸桿菌顯色(se)培(pei)養基 陰(yin)溝腸桿菌ATCC23355 |
貯存
制備(bei)好的平板應(ying)立即(ji)使用,應(ying)避(bi)免光(guang)線直接照射。干燥培養(yang)基應(ying)放置(zhi)于陰暗(an)干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避(bi)光(guang)保存。
失效
干燥培養基超過保質(zhi)期(qi)、結塊和顏(yan)色變化都不(bu)能使用(yong)。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
大腸桿菌顯色培養基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
注:回收率計算時,用TSA瓊脂(zhi)做(zuo)對照培養基。
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