其中(zhong)，濕熱(re)滅菌(jun)法又包括四種方式：煮沸法、流(liu)動蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽(qi)滅菌(jun)法、間歇(xie)滅菌(jun)法和壓力蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽(qi)滅菌(jun)法。通常來說，使用比較(jiao)多的是壓力蒸(zheng)(zheng)(zheng)汽(qi)滅菌(jun)法。

　　但(dan)是(shi)對(dui)于有些培養基來說(shuo)，高(gao)壓條件會損(sun)壞培養基中的(de)某些成分(fen)，不利于培養基的(de)使用，所以只能采用煮沸滅菌(jun)的(de)處理方(fang)法。

　　接下來主要就煮(zhu)沸滅菌(jun)方法進行(xing)討論，話不(bu)多說一起(qi)看(kan)看(kan)吧。

　　一、煮(zhu)沸滅菌的(de)常見表述

　　有(you)關煮(zhu)沸滅菌(jun)的描述，通常有(you)如下幾種方(fang)式：

　　a、稱取本品41.5g，加熱(re)溶解(jie)于1000ml蒸(zheng)餾水(shui)中(zhong)，煮沸不(bu)要(yao)超(chao)過(guo)2分鐘。無需(xu)高壓滅菌。臨用時制備(bei)，不(bu)得超(chao)過(guo)3小時。(參考VRBA培養基(ji)：點擊查看)

　　b、稱取本品50.3g，加(jia)入1000ml蒸餾水中，加(jia)熱煮沸至(zhi)*溶解，冷至(zhi)45-50℃，搖(yao)勻(yun)，傾(qing)入無菌平(ping)皿(min)備用。無需高壓(ya)滅菌。(參考BS培養基：點擊查看)

　　c、稱取(qu)本品89g，煮(zhu)沸溶解于1000ml蒸餾(liu)水(shui)中，冷至45-50℃時，傾入(ru)無(wu)菌(jun)平皿，備用。注：無(wu)需高壓滅菌(jun)。(參考TCBS培養基：點擊(ji)查(cha)看)

　　d、稱(cheng)取本品57g，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中(zhong)，不要過分加熱，冷至50-55℃時，傾入無(wu)菌(jun)平皿(min),部分開蓋(gai)干燥2h，然后蓋(gai)上(shang)，備用(yong)。無(wu)需高壓滅菌(jun)。在 24小(xiao)時內使用(yong)。(參(can)考XLD培養基：點擊查(cha)看)

　　這些方法描述中，都特別強調“無需高壓滅(mie)(mie)菌(jun)”、“不(bu)要過分加熱”、“煮沸充分溶解”，那(nei)么究(jiu)竟該怎樣操作(zuo)，才(cai)能(neng)達(da)到(dao)既滅(mie)(mie)菌(jun)*又盡(jin)量降低對培養基的破壞呢?

　　二、煮沸(fei)滅菌的(de)實際(ji)操作

　　1、關于煮(zhu)(zhu)沸方式(shi)，有人提出可以隔(ge)水(shui)煮(zhu)(zhu)沸，但經過反復試驗，發現這種(zhong)煮(zhu)(zhu)沸方式(shi)存(cun)在兩(liang)大弊端：①溫(wen)度不(bu)夠，達不(bu)到滅菌效(xiao)果;②經隔(ge)水(shui)煮(zhu)(zhu)沸的(de)含瓊脂培養基(ji)，在水(shui)浴的(de)過程(cheng)中易出現分層(ceng)現象。

　　2、為(wei)了對培養(yang)基(ji)進行(xing)有效煮沸滅菌(jun)，根據我(wo)們實踐摸(mo)索，建議如下操(cao)作：

　　①準備好電(dian)磁爐和搪瓷缸(不(bu)要用(yong)鐵質(zhi)容器);

　　②將(jiang)培養基按(an)比例(li)加水(shui)，稱量(liang)至(zhi)搪瓷缸中，用玻(bo)璃(li)棒不(bu)斷攪拌，直至(zhi)*溶解、無明顯團狀物或顆粒;

　　③將搪瓷(ci)缸(gang)置(zhi)于電磁爐上(shang)(shang)(shang)，大火燒開，期間持續攪(jiao)拌，避(bi)免糊底;當液(ye)面*沸(fei)騰(teng)后(hou)，立即將搪瓷(ci)缸(gang)從電磁爐上(shang)(shang)(shang)拿開，算(suan)是一次煮(zhu)沸(fei)操(cao)作;液(ye)面回落后(hou)，立即放回電磁爐，重復上(shang)(shang)(shang)面的步驟;總共煮(zhu)沸(fei)3次即可。

　　④將煮好的(de)培(pei)養基冷卻(que)至需要的(de)溫度，進行傾注平皿等操作。